witam!
Chciałbym zapytać o hybrydyzację Northern, z sondą RNA. Chodzi mi właściwie o to w jakiej temperaturze prowadzicie pre- i hybrydyzację z sonda RNA (ja tylko powiem, że ostatnio robiłem to w 68st.C, jak zalecał producent buforu hybrydyzacyjnego) ne jestem jednak pewien czy taka temperatura nie jest trochę za wysoka, przy hybrydyzacji Northern.
Mam również pytanie dotyczące ponownego użycia sondy do hybrydyzacji (np. innej membrany). Jaki przewidujecie czas denaturacji takiej sondy? Wiem, że dla sondy DNA jest to 10min. w gotującej się wodzie.a dla sondy RNA
Dzięki za odpowiedzi.
hybrydyzacja Northern
Re: hybrydyzacja Northern
Moze wMolecular cloning Maniatisa znajdziesz jakies odpowiedzi?
Wydaje mi sie, ze temp. hybrydyzacji jest zalezna od dlugosci i skladu nukleotydowego sondy. Jezeli masz sonde bogata w pary AU, no to moze byc problem. Moze znajdziesz w zakladzie kogos z doswiadczeniem? Najlatwiej jednak dobierac takie zmienne wiedzac dokladnie co sie robi i co wychodzi, a co nie wychodzi.
Wydaje mi sie, ze temp. hybrydyzacji jest zalezna od dlugosci i skladu nukleotydowego sondy. Jezeli masz sonde bogata w pary AU, no to moze byc problem. Moze znajdziesz w zakladzie kogos z doswiadczeniem? Najlatwiej jednak dobierac takie zmienne wiedzac dokladnie co sie robi i co wychodzi, a co nie wychodzi.
-
- Podobne tematy
- Odpowiedzi
- Odsłony
- Ostatni post
-
- 2 Odpowiedzi
- 13963 Odsłony
-
Ostatni post autor: karolajn_a
9 mar 2015, o 19:34
-
-
Wiązania i hybrydyzacja
autor: Hymenophyllum » 23 lut 2016, o 16:23 » w Chemia w szkole i na studiach - 1 Odpowiedzi
- 4487 Odsłony
-
Ostatni post autor: kinga1505
30 kwie 2016, o 11:22
-
-
- 5 Odpowiedzi
- 4847 Odsłony
-
Ostatni post autor: M94
5 sie 2014, o 13:27
-
-
kwas karboksylowy, hybrydyzacja
autor: Berberis » 21 sie 2015, o 10:28 » w Chemia w szkole i na studiach - 1 Odpowiedzi
- 1754 Odsłony
-
Ostatni post autor: adamantan
21 sie 2015, o 11:52
-
-
-
hybrydyzacja i inne problemy
autor: iissabell » 19 lut 2015, o 15:14 » w Chemia w szkole i na studiach - 2 Odpowiedzi
- 1682 Odsłony
-
Ostatni post autor: tomaszp
19 lut 2015, o 19:44
-
Kto jest online
Użytkownicy przeglądający to forum: Obecnie na forum nie ma żadnego zarejestrowanego użytkownika i 4 gości