Witam,
transformowałam E.coli DNA izolowanym z drożdży zawierającym m.in plazmidy z bankiem drożdżowym. Z tak otrzymanych trnasormantów metodą lizy alkalicznej wyizolowałam plazmidy (miałam zamiar te z bankiem drożdżowym) wytrawiłam przez noc odp enzymem ale wynik elektroforezy mnie zaskoczył. Nie było widać prążków wstawki z banku. był tylko 1 prążek. Czy jest możliwość, że szukane przeze mnie wektory z banku sa zbyt duże jak na izolację metoda lizy alk.? Czy ta metoda ma jakieś ograniczenia wielkościowe co do plazamidów? Czy ewentualnie izolacja za pomocą kolumn była by lepsza?
za duży plazmid na metodę alkaliczną?
Re: za duży plazmid na metodę alkaliczną?
Spróbuj wyizolować kolumnami, sama jestem ciekawa, czy wyjdzie .
Re: za duży plazmid na metodę alkaliczną?
A mnie się wydaje, że w tym doświadczeniu jest wiele kroków, które mogą nie wypalić - np, transformacja. Jesteś pewna, że to odpowiednie DNA udało Ci się wrzucić do bakterii?
Kto jest online
Użytkownicy przeglądający to forum: Obecnie na forum nie ma żadnego zarejestrowanego użytkownika i 0 gości